Protéases de Lactobacilles et Activités Biologiques des hydrolysats de Caséines
Protéases de Lactobacilles et Activités Biologiques des hydrolysats de Caséines
Fichiers
Date
2025-06-14
Auteurs
ZATER Zohra Yasmine
Nom de la revue
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Titre du volume
Éditeur
Université oran1
Résumé
La souche CHFM, productrice de protéase caséinolytique (ClpP), a été isolée à partir de lait de chèvre fermenté Algérien et identifiée comme Lactiplantibacillus pentosus sur la base de l’analyse de la séquence de l’ARNr 16S. Les conditions optimales d’expression de cette protéase ont été déterminées dans un milieu MRS modifié, avec substitution de la peptone par de la caséine, à un pH de 8,0, une température comprise entre 25 °C et 55 °C et une incubation de 48 heures. Le séquençage du gène clpp a révélé deux substitutions conservatrices (Thr161Ser et Asp182Glu). L’analyse bio informatique a permis de confirmer sa stabilité thermique, d’estimer son poids moléculaire à 21,5 kDa et son point isoélectrique à 4,78. La protéase ClpP a été exprimée dans un vecteur d’expression pET21 (a+) dans la souche Escherichia coli BL21(DE3) à 37 °C avec une induction par 0,3 mM d’IPTG. La purification de la protéine recombinante a été réalisée par chromatographie d’affinité IMAC, suivie d’un dessalage. L’activité hydrolytique a été évaluée sur trois types de caséines (vache, chèvre et chamelle), révélant une hydrolyse complète en 24 h pour la caséine de vache et en 48 h pour les caséines de chèvre et de chamelle. Les hydrolysats obtenus ont été caractérisés pour leurs activités antibactérienne et antioxydante (in vitro). L’évaluation antibactérienne par la méthode des puits a mis en évidence une inhibition significative de Micrococcus luteus et de Staphylococcus aureus multirésistant. La concentration minimale inhibitrice (CMI) a révélé une meilleure efficacité des hydrolysats de caséine de chèvre et de chamelle (CMI = 3 mg/mL) comparée à la caséine de vache (CMI = 6,25 mg/mL). L’évaluation de l’activité antioxydante a montré une augmentation significative du pouvoir antioxydant après hydrolyse enzymatique. Le taux de piégeage du DPPH est passé de 20 % à 50 % pour la caséine de chamelle, de 20 % à 30 % pour la caséine de vache et de 30 % à 40 % pour la caséine de chèvre. Ces résultats démontrent le potentiel de la protéase ClpP recombinante de Lpb. pentosus comme un outil biotechnologique pour la production de peptides bioactifs. Cette approche ouvre de nouvelles perspectives pour des applications dans les domaines agroalimentaire, vétérinaire et pharmaceutique
Description
Mots-clés
Lait de chèvre ; Lactiplantibacilluspentosus ; protéase ClpP recombinante ; chromatographie d’affinité ; hydrolysats, activité antioxydante ; activité antibactérienne