Département de Biotechnologie

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    Kit de diagnostic PCR à faible coût de la tuberculose humaine et bovine
    (0004-07-23) ALLAOUA Nesrine; ABDERRAHMANE Meriem
    La tuberculose est une maladie infectieuse qui subsiste toujours aujourd'hui malgré les efforts déployés pour l'éradiquer. Selon l'OMS, il s'agit de l'une des pathologies due à un seul germe les plus meurtrières dans le monde avec des chiffres de décès annuel dépassant le million. Chez l'homme, la maladie est provoquée par la bactérie Mycobacterium tuberculosis, mais pas que. La tuberculose peut se transmettre via d'autre espèces, dans ce cas on parle d'infection zoonotique. Mycobacterium bovis qui affecte généralement les bovins peut se transmettre à l'homme via un animal infecté ou même à travers la consommation de produits d'animaux contaminés tel que le lait cru non pasteurisé. En Algérie, la tuberculose reste un problème de santé publique, bien qu'il y ait eu des progrès dans la lutte contre la maladie. Les outils moléculaires ont joué un rôle crucial dans le diagnostic de la tuberculose, offrant des avantages significatifs par rapport aux méthodes de diagnostic conventionnelles (Culture/Microscopie). Sur ce, dans le cadre de ce travail, nous avons désiré faire valider un test moléculaire « la PCR multiplexe» pour l’identification des deux espèces M. tuberculosis et M. bovis. Pour ce faire, cinquante-huit souches provenant de spécimens humains, dont 41 infectés par une tuberculose extrapulmonaire et 12 par une tuberculose pulmonaire, ainsi que 5 échantillons provenant de lait bovin ont été prélevés. Ces souches ont été testés par cette PCR qui utilise les amorces AM 1/2/3. Sur les 58 souches étudiées, cette PCR a pu détecter 56 souches positives, avec 35/41 de type M. tuberculosis et 4/41 de type M. bovis pour les échantillons extrapulmonaires, 12/12 souches de type M. tuberculosis pour les pulmonaires et 5/5 souches de type M. bovis pour le lait bovin. Nous avons fait passer cette même PCR par un protocole de validation. La série de tests comprenaient la mesure de la limite de détection, de la spécificité, de la reproductibilité et de la répétabilité. Cette PCR est capable de détecter l’ADN de moins d’un bacille par 1 μl d'échantillon avec des résultats constants à chaque répétition. Les résultats que nous obtenus sont jugés fiables ce qui indique que la PCR est un bon outil de dépistage à la fois rapide, peu coûteux et spécifique de la tuberculose.